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条件性敲除小(大)鼠


技术原理简介
       条件性基因敲除主要是通过Cre/LoxP重组系统来实现的。该系统是位点特异性重组酶系统,已发展成为在体内、外进行遗传操作的有力工具。其可以使靶基因的表达或缺失发生在试验动物发育的某一阶段或某一特定的组织器官。此外,若与控制Cre表达的其他诱导系统相结合,还可以对某一基因同时实现时空两方面的调控。
       唯尚立德公司自主研发的第三代基因敲除敲入系统,该系统采用受精卵注射的方式将一对LoxP序列高效地插入到基因组上,较传统的ES系统的方法提高了近2000倍。本公司最快3个月可以得到Founder!郑重承诺,失败全额退款!



TALEN/CRISPR构建条件性敲除小(大)鼠技术流程图



服务流程及周期


服务流程及周期图


步骤   
内容   
周期
Cas9/gRNA的合成和同源模板(Donor)构建合成Cas9/gRNA,检测Cas9/gRNA活性,构建同源模板质粒2个月
得到Founder
Cas9/gRNA体外转录成mRNA和Donor质粒共同显微注射受精卵,胚胎移植到代孕母鼠子宫,3周后出生,2周龄基因型鉴定。2-3个月
得到F1代杂合子2个月后性成熟,Founder和野生型小鼠交配,3周后出生,2周龄基因型鉴定,获得稳定传代的基因突变杂合子F1代。3-4个月


流程对比
唯尚特有打靶技术——小鼠、大鼠(7-9个月)

同行ES打靶技术——小鼠(11-15个月)

传统ES打靶技术——小鼠(18-27个月)


我们的优势