CN EN
您当前所在的位置: 网站首页 >> >我们的业务 >> 基因编辑技术服务 >> CRISPR/Cas9载体构建服务

CRISPR/Cas9载体构建服务


简介:

      Clustered regularly interspaced short palindromic repeat (CRISPR)/Cas9是细菌和古细菌的一种不断进化适应的免疫防御机制。CRISPR/Cas9利用一段小 RNA 来识别并进行有效的靶向DNA剪切。



(来自Nature Biotech. 2012:30, 836–838)


服务内容:CAS9/gRNA质粒构建全套解决方案

步骤

服务内容

配套产品

明确物种和载体

不同物种不同载体,清单请详见:CRISPR/Cas9快速构建试剂盒


 

设计靶点

一般在不同转录产物的共同外显子上设计3-5个靶点,靶点位置尽量在基因CDS的前1/3,ATG之后,不在最后一个exon上,最好能破坏重要的domain和所有的转录产物isoform。


 

合成

合成前请检测靶点是否存在SNP

T7E1酶

靶点切割活性检测

293T细胞内检测SSA活性

CAS9酶体外切割活性验证

SSA活性报道质粒构建试剂盒、Cas9-gRNA靶点效率检测试剂盒、CAS9酶

内源活性验证(有条件选择)

若目的细胞转染效率高,如293T细胞,可转染72h后提基因组,扩增靶序列,T7E1酶切验证,进一步测序验证。

T7E1酶


订购单下载gRNA订单表Ver2.0