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NPSG小鼠

一、NPSG小鼠简介

       NPSG小鼠是唯尚立德公司与菲诺克生物公司共同研发的,具有高度免疫缺陷型小鼠,与国际上的NSG或NOG属于同一类型,均为NOD-Prkdcscid Il2rgnull型小鼠。NPSG小鼠是在Balb/c的背景下,应用现在CRISPR/Cas9基因编辑技术改造得来,经过多种方法检测,基因型及表现型能够稳定遗传,不存在个体差异,是目前国际公认的免疫缺陷程度最高、最适合人源细胞移植的工具小鼠。

       NPSG小鼠先天免疫缺陷,缺少T和B细胞且NK细胞的活性几乎丧失,因此对人源细胞和组织几乎没有排斥反应。NPSG小鼠具有寿命长、成瘤效率高和免疫缺陷程度高等特点,特别适合人源细胞或组织移植、肿瘤、免疫学和人类疾病感染模型等研究。

 

二、 NPSG小鼠特点

      1) NOD(non-obese diabetes)遗传背景:自发I型糖尿病;其巨噬细胞对人源细胞吞噬作用弱;先天免疫系统,如补体系统和树突状细胞功能降低。

      2) Prkdcscid:Prkdc(protein kinase DNA-activated catalytic)基因突变,小鼠的T和B细胞缺失 ,表现为细胞免疫和体液免疫的重度联合免疫缺陷(severe combined immune deficiency, scid)。

      3) Il2rgnull:Interleukin-2受体的gamma链(IL-2R γc,又称CD132)是具有重要免疫功能的细胞因子Il2、Il-4、Il-7、Il-9、Il-15和I-21的共同受体亚基,该基因敲除后的小鼠机体免疫功能严重降低,尤其是NK细胞的活性几乎丧失。


三、 NPSG小鼠优点

        1) 平均寿命长达1.5年,为实验预留充足的时间;

        2) 对人源细胞和组织几乎没有排斥反应;

        3) 少量细胞即可成瘤,节省人力物力和时间;

        4) 实验结果精度高,可比性强,反应均一;

        5) 迄今世界上免疫缺陷程度最高的工具小鼠。


四、 科研应用领域

       1) 人源细胞或组织移植

       2) 肿瘤和肿瘤干细胞研究

       3) 造血和免疫学研究

       4) 人类疾病感染模型研究

       5) 人源化免疫系统重建


五、 NPSG小鼠鉴定

       取小鼠红细胞,经过裂解后进行荧光抗体颜色和流式细胞技术检测。具体实验如下:


        1)、小鼠血液细胞染色  

        注:FL1-mouse CD3 FITC染色,染T细胞;FL2-mouse CD19 PE 染色,染B细胞;FL4-mouse NKP46 APC 染色, 染NK细胞



      2)小鼠血液细胞统计

      3)C57BL/6J、NOD和NPSG小鼠实验结果

         A.FSC-SSC图中可以看出,相比BALB/C野生型小鼠,NPSG的白细胞分群更为集中,说明细胞类型非常单一。

         B.流式分选及统计结果对比显示:NPSG鼠的T、B、NK细胞表现为高度缺失。